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病毒滅活試驗(yàn)的三個(gè)機(jī)理是什么？

發(fā)布時(shí)間：2021-07-30 360

　　隨著人們生活質(zhì)量的提高，消毒產(chǎn)品、紡織品、塑料制品等各類產(chǎn)品的抗病毒性能成了產(chǎn)品銷售的加分項(xiàng)。測(cè)試產(chǎn)品的抗病毒性能需依據(jù)ISO18184、ISO21702等標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)規(guī)范，進(jìn)行病毒滅活試驗(yàn)。那么病毒滅活試驗(yàn)中有哪些機(jī)理呢？下面讓中科檢測(cè)帶你了解。

　　病毒滅活試驗(yàn)病毒懸液的制備過程

　　1、從液氮中取出凍存的試驗(yàn)用宿主細(xì)胞，在37℃溫水中迅速融化，用毛細(xì)吸管移植于含有細(xì)胞維持液的細(xì)胞管內(nèi)，吹吸數(shù)次，使混勻,立即離心(3000r/min，3min)，去上清液。再加入適當(dāng)?shù)募?xì)胞維持液，吹吸數(shù)次，使混勻，同上離心后，轉(zhuǎn)種于加有10培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中。逐日觀索細(xì)胞生長(zhǎng)情況，在細(xì)胞長(zhǎng)滿單層時(shí)，用于消毒試驗(yàn)。

　　2、取出低溫凍存的試驗(yàn)病毒毒種，37℃水浴融化，用細(xì)胞維持液作10倍稀釋，然后接種于已經(jīng)長(zhǎng)滿單層細(xì)胞的細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，置37℃溫箱中，使與細(xì)胞吸附、生長(zhǎng)。逐日觀察病變，待3/4細(xì)胞出現(xiàn)病變時(shí)，收獲病毒。

　　3、將含有病毒及宿主細(xì)胞的培養(yǎng)液，在冰浴條件下，用超聲波(或反復(fù)凍融)破碎宿主細(xì)胞，釋放病毒。然后，盡快離心(6000/min,15min)去除沉淀(主要為細(xì)胞碎片)，上清液即為所需的病毒懸液。按每管1.0分裝于無菌離心管(1.5)中。

　　4、取1支病毒懸液，按病毒滴度測(cè)定法，測(cè)定其病毒滴度。其余均冷凍保存于-80℃?zhèn)溆谩?/div>

　　病毒滅活試驗(yàn)三種機(jī)理

　　1、破壞包膜：包膜含有脂類物質(zhì)，因之有包膜的病毒可以很快速的被脂溶劑破壞，如氯仿或去氧膽酸鈉可以使病毒滅活。實(shí)際上可以利用病毒對(duì)脂溶劑的敏感性來檢查病毒是否有包膜。物理因子，如滲透壓改變、凍融、熱和干燥等都可以引起包膜破壞。一般認(rèn)為，呼吸道感染的病毒對(duì)于燥抵抗力弱，傳播主要是人間直接感染，這是因?yàn)橛邪さ木壒省?/div>

　　2、病毒蛋白質(zhì)變性：能使蛋白質(zhì)變性的化學(xué)制劑都能使病毒滅活，如酚、次氯化物、酸和堿等。加熱引起變性也是有效滅活的方法。一般說病毒對(duì)熱抵抗力弱，60℃幾分鐘就使之感染性明顯降低，因此在分離病毒時(shí)，從患者取來的標(biāo)本需低溫保存，迅速送往實(shí)驗(yàn)室，長(zhǎng)期保存置于-80℃以下的低溫條件。

　　3、病毒核酸的損害：y線等電離輻射可以切斷核酸，紫外線可以使核苷酸鏈上相鄰的嘧啶堿基形成二聚物，而破壞病毒基因的功能。另外吖啶橙或中性紅等染料可以和病毒核酸結(jié)合，暴露在光線之下，可以使核酸分解，從而使病毒滅活。

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